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毛細管電泳儀工作原理
毛細管電泳是一種以彈性石英毛細管為分離通道,以高壓直流電場(chǎng)為驅動(dòng)力,根據樣品中各組分遷移率和分布行為的差異,實(shí)現分離的電泳分離分析方法。
使用的設備
電源:有0~30kV可調電壓和穩壓電源,內徑小于100μm(常用50~75μm),長(cháng)度一般為30~100cm彈性石英毛細管、電極槽、檢測器和取樣裝置。
檢測器有:紫外、可見(jiàn)光譜檢測器、激光誘導熒光檢測器和電化學(xué)檢測器,其中z常用的是紫外檢測器。
取樣方法有:電動(dòng)法(電遷移)、壓力法(正壓、負壓)和虹吸法。
整套儀器還配備了自動(dòng)沖洗、自動(dòng)取樣、溫度控制、數據采集和處理等部件。
毛細管電泳產(chǎn)生的電泳原理:
用于毛細管電泳的石英毛細管柱,當pH值大于3時(shí),內表面帶負電,與緩沖液接觸形成雙電層。形成雙電層一側的緩沖液帶正電,向負極移動(dòng),形成電滲流。同時(shí),在緩沖溶液中,在電場(chǎng)的作用下,帶電粒子以不同的速度向與帶電極性相反的方向運動(dòng),形成電泳。帶電粒子在毛細管緩沖液中的遷移速度等于電泳流和電滲流的矢量和。各種粒子由于所攜帶的電荷量、質(zhì)量、體積、形狀等因素造成的遷移速度不同而被分離。